3月28日，復(fù)旦大學(xué)科技考古研究院文少卿團(tuán)隊、生命科學(xué)學(xué)院金力團(tuán)隊聯(lián)合廈門大學(xué)王傳超團(tuán)隊及陜西省考古研究院在Cell Press細(xì)胞出版社旗下期刊Current Biology上以“Ancient Genome of the Chinese Emperor Wu of Northern Zhou” 為題發(fā)表研究論文。

圖1：該研究在Current Biology網(wǎng)站發(fā)布截圖

該研究以北周武帝（以下簡稱“武帝”）遺骸中提取的古DNA為樣本，基于探針捕獲方案進(jìn)行建庫，運用華大智造DNBSEQ-G99等測序平臺成功獲取了武帝的低深度全基因組信息以及該基因組中的眾多SNP位點信息，結(jié)合歷史學(xué)、考古學(xué)等多學(xué)科知識，以及顱面復(fù)原技術(shù)，為揭示武帝面部特征、生前罹患疾病可能情況、族源分析提供了有力證據(jù)，并最終實現(xiàn)武帝容貌的復(fù)原。

“一代雄主”北周武帝長啥樣？“一代雄主”北周武帝長什么樣？此前，人們只能根據(jù)著名畫家閻立本的《歷代帝王圖》（圖2E）進(jìn)行合理想象。如今，隨著科技的進(jìn)步，研究團(tuán)隊計劃結(jié)合古基因組學(xué)與顱面復(fù)原技術(shù)對北周武帝面貌進(jìn)行復(fù)原，揭開歷史謎題。

圖2：武帝面部三維重建以及面部特征預(yù)測

2015年4月，研究團(tuán)隊正式前往西安對武帝及阿史那皇后遺骨進(jìn)行采樣?？紤]到保護(hù)武帝顱骨的完整性，在采樣時，研究團(tuán)隊沒有選取DNA保存最好的顳骨和牙齒部分，而是選擇了肢骨斷片。

多年來，在考古工作人員中口口相傳著一句話——“大墓不見人骨”，由于大型墓地中氧氣充分，人骨更易腐敗，因此往往保存狀況不佳，能提取到的DNA樣本里，大部分為土壤微生物DNA，人的DNA占比僅為千分之一。在這樣的條件下，想從中獲取DNA，并成功完成后續(xù)測序和分析是很有挑戰(zhàn)性的。經(jīng)過6年的反復(fù)嘗試，通過探針富集技術(shù)與高通量測序技術(shù)，團(tuán)隊成員首次獲取約10萬個可用的基因位點。

圖3：論文核心研究方法截圖（部分）

由于武帝的肢骨DNA樣本的污染率高，其基因組的解密面臨著曲折的路，已獲得的10萬個位點僅可滿足基本的族源分析，對于推測武帝的面貌特征和死因而言則力有不逮。經(jīng)過1年的努力，研究團(tuán)隊針對高度降解樣本優(yōu)化出一套全新技術(shù)方案，包含高效獲取短片段的磁珠提取方法、對短片段友好的單鏈建庫方法和專門適用于古DNA的捕獲探針。2023年9月，在新技術(shù)加持下，結(jié)合DNBSEQ-G99在內(nèi)源率和文庫復(fù)雜度方面的優(yōu)異表現(xiàn)，團(tuán)隊終于再次在武帝肢骨樣本上獲取了約100萬個可用的基因位點，較上次提高10倍。這次結(jié)果，使得團(tuán)隊成功獲取武帝相貌復(fù)原的色素沉積相關(guān)位點和疾病推斷相關(guān)位點，并進(jìn)一步對武帝族源進(jìn)行更精細(xì)的定量分析。

在此基礎(chǔ)上，研究團(tuán)隊結(jié)合顱骨CT掃描技術(shù)，對武帝進(jìn)行了初步的面貌復(fù)原（圖2A，B），并分析了控制頭發(fā)、皮膚和瞳孔色素相關(guān)的基因位點，對武帝的面貌進(jìn)行了一次跨越千年的“面部重建”（圖2C）。復(fù)原結(jié)果顯示，北周武帝宇文邕有著黑色頭發(fā)、黃色皮膚和棕色眼睛，符合典型的東北亞、東亞人長相，與人們想象中鮮卑族相貌具有強(qiáng)烈異域特色——須發(fā)茂盛、發(fā)色偏黃和高鼻深目大不相同（圖2D）。

頭戴帝冕、清瘦英武、不怒自威，這是我國首次以科技考古方式復(fù)原古代帝王容貌，賦予歷史以鮮活氣息。

“胡漢混血”揭秘鮮卑族群歷史起源

多年來，鮮卑人的外貌長相是歷史學(xué)界較具爭議的話題之一。此外，鮮卑人群的起源之說也是歷史學(xué)和人類學(xué)領(lǐng)域的重要課題。通過對武帝基因組進(jìn)行分析，研究團(tuán)隊從遺傳學(xué)角度揭示了武帝及其家族的族源，對理解鮮卑人群的長相特征與起源提供了重要證據(jù)。

復(fù)旦科技考古團(tuán)隊認(rèn)為，武帝宇文邕是胡漢混血兒。通過遺傳學(xué)分析，研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)，武帝與古代契丹人、黑水靺鞨人以及現(xiàn)代達(dá)斡爾人、蒙古人存在最近的遺傳關(guān)系，并估計武帝血統(tǒng)有六成源于古代黑龍江流域的東北亞人群，三成源于古代黃河流域的農(nóng)業(yè)人群。武帝家族譜系表明他的祖母王氏可能是北方漢人，所以，武帝約三分之一的古代黃河流域血統(tǒng)極可能是鮮卑與漢族長期通婚的結(jié)果。因此，推斷武帝的這種遺傳構(gòu)成很可能是由于鮮卑皇室與當(dāng)?shù)貪h族貴族之間長期通婚所致。

武帝的遺傳起源分析為在漢人的形成過程中漢族與非漢貴族的通婚融合過程提供了直接證據(jù)。同時，不同地理區(qū)域的鮮卑人內(nèi)部也存在一定的遺傳差異，說明鮮卑族群的形成也是一個充滿動態(tài)變化的過程，受到與周邊其他人群通婚融合的影響。

圖4（A）武帝的墓穴所在地及其與其他族群的親緣關(guān)系介紹；（B）孝陵平面圖；（C）墓道、墓室文物分布圖；（D）北周武帝墓志銘

這一發(fā)現(xiàn)，為南北朝時期貴族之間“胡漢融合”找到了直接證據(jù)，對理解漢民族的形成意義重大。

“千年懸案”終破解——武帝死因之謎

長期以來，武帝的死因撲朔迷離，此前主要通行兩種說法：其一為死于烈性疾病，其二為死于中毒。借助科技考古手段，團(tuán)隊對這個流傳千余年的懸案進(jìn)行了一場“遲來”的法醫(yī)鑒定。

在對武帝的基因組進(jìn)行疾病易感性分析后，研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)武帝攜帶的6個疾病相關(guān)的風(fēng)險基因位點中，其中之一就與中風(fēng)相關(guān)。這一發(fā)現(xiàn)為解開武帝死因之謎提供了新的線索。

同時，對武帝遺骸股骨樣本中33種微量元素進(jìn)行分析后，研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)，其體內(nèi)砷（As）的含量顯著高于同時期古代平民和貴族的平均水平?！叭梭w中不同部位骨骼反映了生前不同階段的元素累積過程，股骨反應(yīng)的是十年以上的代謝過程，說明這些元素是在長期飲食中累積在骨骼中的。”研究團(tuán)隊介紹。

在武帝生活的魏晉南北朝時期，服用丹藥是社會上層所崇尚的精神追求和生活方式，以求滋補(bǔ)長生。所謂丹藥，其實是不同晶體形式的無機(jī)化合物，由多種礦物高溫?zé)铺釤挾?，在中國有兩千多年的使用歷史。《抱樸子內(nèi)篇》等典籍均顯示，不同丹藥的成份雖有所差別，但雄黃與礬石是其中代表成份。

結(jié)合武帝遺骸中如砷、銻等重金屬元素偏高和南北朝時期上流社會喜食丹藥的生活習(xí)慣，武帝也有可能死于重金屬元素慢性中毒及相關(guān)并發(fā)癥。

關(guān)于北周武帝的考古研究不僅僅是一個古代皇帝的基因研究，它還揭示印證了古代人群的遷徙、混合和文化交融的歷史。文少卿副教授表示：“從武帝研究出發(fā)，團(tuán)隊還將不斷升級技術(shù)方案，繼續(xù)檢測不同時序和不同考古文化的古代樣本，持續(xù)梳理匈奴、突厥、鮮卑、吐谷渾、粟特等三到九世紀(jì)北方古族的遺傳譜系，重現(xiàn)唐朝大一統(tǒng)時代海納百川的盛況，做全東亞人的遺傳譜系樹，建立現(xiàn)代人與古代人的聯(lián)系，書寫中華民族的‘大家譜?！?/span>

高通量測序革新古基因組研究

2023年10月3日，備受矚目的2022年諾貝爾生理學(xué)獎公布得獎人是瑞典遺傳學(xué)家Svante P??bo，這被稱為迄今為止距離基因組學(xué)及高通量基因測序最近的諾獎。P??bo建立了一個全新的科學(xué)學(xué)科古基因組學(xué)，完成了看似不可能的事情：采用高通量測序技術(shù)對當(dāng)今人類已滅絕的近親——尼安德特人的基因組進(jìn)行測序。

高通量測序技術(shù)的出現(xiàn)促進(jìn)了基因組學(xué)的快速發(fā)展，古基因組學(xué)也因此開始成為考古學(xué)、遺傳學(xué)研究中的大熱門。高通量測序技術(shù)能克服PCR存在的不足，其理論上能檢測樣本中所有DNA分子的信息，即使古DNA含量極低，高通量測序也能很有效地對其進(jìn)行測序。不僅如此，通過搭建生物信息學(xué)分析流程，結(jié)合參考基因組，還能快速檢測到樣本中是否存在古DNA損傷，從而達(dá)到鑒別古DNA的目的。同樣重要的一點是，隨著技術(shù)的成熟，測序成本逐年降低，這也使得古基因組研究領(lǐng)域得以發(fā)展壯大。

文少卿副教授作為古基因組學(xué)研究專家，系統(tǒng)性地驗證了華大智造DNBSEQ測序平臺可完美應(yīng)用于古DNA的高通量測序研究。2022年，文少卿副教授負(fù)責(zé)的生物考古團(tuán)隊運用MGISEQ-2000測序平臺，對“長江口二號”中出水瓷瓶中的稻殼進(jìn)行碳十四測年和古植物DNA研究，成功總結(jié)出古船的沉積過程和長江口水環(huán)境的變遷；同年11月，文少卿副教授研究團(tuán)隊聯(lián)合廈門大學(xué)王傳超教授團(tuán)隊的研究文章--Cultural and demic co-diffusion of Tubo Empire on Tibetan Plateau中，成功獲取了距今1202-1380年的10例古代個體全基因組序列，揭秘吐蕃源流史，該研究同樣運用華大智造MGISEQ-2000基因測序平臺完成。

華大智造DNBSEQ測序平臺在測序數(shù)據(jù)質(zhì)量、文庫復(fù)雜度、基因組覆蓋均一性和種群遺傳分析均表現(xiàn)優(yōu)異，在其他重要關(guān)鍵參數(shù)上媲美古基因組學(xué)研究中常用的高通量測序平臺，可作為大多數(shù)古基因組學(xué)研究的潛在選擇。

華大智造始終致力于成為“生命科技核心工具締造者”，華大智造高通量測序平臺等生命科技核心設(shè)備將持續(xù)賦能生物考古學(xué)、分子考古學(xué)等古基因組學(xué)研究領(lǐng)域，助力用戶和合作伙伴產(chǎn)出更多研究成果，為重現(xiàn)人類生動歷史、呈現(xiàn)群體精彩故事貢獻(xiàn)力量。

小知識：

北周武帝是誰？北周是南北朝時期由鮮卑人建立的朝代之一，其第三位皇帝北周武帝宇文邕（公元543至578年）在位期間，大舉實行軍政改革，并統(tǒng)一中國北方，促進(jìn)民族融合，為隋唐的大一統(tǒng)奠定了基礎(chǔ)。公元578年，親征突厥途中，年僅36歲的北周武帝突發(fā)惡疾、英年早逝，對后續(xù)歷史進(jìn)程產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響，其族源、外貌長相及死因一直備受學(xué)術(shù)界和民間愛好者的關(guān)注。（有知情人透露，很多影視劇里宇文玥的歷史原型就是北周武帝宇文邕，跟蘭陵王高長恭斗智斗勇的那個就是他。）

資料來源：新華社客戶端、復(fù)旦大學(xué)科技考古研究院、澎湃新聞、 CellPress細(xì)胞科學(xué)等。